甘肃中医学院开题报告

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　　甘肃中医学院药学系毕业设计(论文)开题报告书

　　课题名称 兰州苦水玫瑰对小鼠心肌缺血的影响

　　专业年级 中药学2010级

　　课题组人员： 陈美君

　　指导教师： 黄世佐

　　起止时间： 2014年3月—4月

　　甘肃中医学院药学系 二○一一年编制

　　一、课题基本情况

　　项目名称 兰州苦水玫瑰对小鼠心肌缺血的影响

　　课题专业性质 中药学

　　课题来源 自选课题

　　其它经费资助 无

　　课题组成员基本情况

　　姓名 性别 所学专业

　　陈美君 女 中药学本科2010级

　　尹灵芝 女 中药学本科2010级

　　乐雯卉 女 中药学本科2010级

　　管仕川 男 中药学本科2010级

　　导师组成员基本情况

　　姓名 性别 专业 所参加科研项目及名称

　　黄世佐 男 中药学 无

　　二、本研究课题的意义及研究内容

　　1.意义：

　　心肌缺血是由于心脏的血液灌注减少,导致心脏的供氧减少,心肌能量代谢异 常,不能支持心脏正常工作的一种病理状态。[1] 心肌缺血是心血管疾病中较为常见的表 现,临床中表现为不同的症状及相关证候特点,《内经》中就早有记载,如《素问·脏气法时论》、有“心病者,胸中痛,胁支满,胁下痛,膺背肩间痛,两臂内痛。”《灵枢·厥病 篇》又有“真心痛,手足青至节,心痛甚,旦发夕死,夕发旦死”类似心肌梗塞的记载。[2] 因本病在临床上多见,且容易导致死亡,因此受到社会各界普遍关注,其发生率较高,在临床上呈逐年增高的趋势,且本病的发生越来越年轻化,因而减少心血管事件的发生成为治疗本病的最根本初衷。从近年来的文献资料来看,中药玫瑰在治疗该病方面玫瑰花在抗肿瘤、抗病毒、治疗心血管疾病及保健、延缓衰老等方面发挥着越来越重要的作用，本课题研究分析玫瑰在这方面的药理作用，为临床合理使用以及进一步对其深入研究奠定了基础。

　　2.内容： 玫瑰花是蔷薇科植物玫瑰Rosa rugosa Thumb的干燥花蕾，性温，味甘、微苦，具有行气解郁、和血、止痛等功效，主治用于肝胃气痛、食少呕恶、月经不调、跌扑伤痛[1]，现主产于山东、甘肃、内蒙古等地[2]。姚可成《食物本草》中记载: “主利肺脾，益肝胆，辟邪恶之气，食之芳香甘美，令人神爽。”《本草纲目拾遗》中记载: “和血行血，理气„„”。《本草正义》中记载: “玫瑰花，香气最浓，清而不浊，和而不猛，柔肝醒胃，流气活血，宣通窒滞而绝无辛温刚燥之弊。”在众多古籍的记载中，玫瑰花的功效可见一斑。现代药理研究表明，玫瑰花的药理作用广泛，尤其是在心血管疾病、免疫炎症的治疗与抗肿瘤、抗氧化以及利胆、解毒等方面有作用[3,4,5,6]，使得这一传统中药在临床上得到更广泛的应用。玫瑰花中含有多种生理活性成分，其中所含挥发油被认为是其主要活性成分。挥发油类化合物主要为芳樟醇、香茅醇、3-甲基己烷、4，5-二甲基辛烷、2-甲基庚烷等[7]，挥发油类化合物具有芳香开窍、活血行气、扩张心血管、改善内脏及外周血液循环的作用。玫瑰花还含有黄酮、有机酸、鞣质等类化学成分，具有降血糖、抗肿瘤、抗菌、抗氧化等作用。此外，还含有天冬氨酸、 亮氨酸、丝氨酸、精氨酸等17种氨基酸。[8]玫瑰精油具有多种药理作用，在本草纲目 中已有记述:"玫瑰花入肝,散脓疡,行血活血"。玫瑰精油具有抑菌、抗氧化、抗敏感、保 起始时间 2014年3月—4月湿、促进细胞再生等功效;对呼吸系统、消化系统、循环系统以及生殖系统方面都有较好的功效;在情绪方面具有镇压、减压、安眠、抗冲突、缓解紧张和抗抑郁等作用。甘肃永登县是我国有名的“玫瑰之乡”。该县盛产的苦水玫瑰(R.Setate×R.Rugosa)是中国玫瑰和钝齿蔷薇的杂交种，有着200多年的栽培历史，是甘肃省主要香料作物之一;年产精油约400kg，占全国玫瑰精油总产量的80%左右;年出口量100kg-200kg。

　　本实验以甘肃永登县苦水玫瑰为研究对象，采用水蒸气蒸馏提取法提取精油，注射异丙肾上腺素制造小鼠急性心肌缺血模型，研究玫瑰精油对小鼠心肌缺血的保护作用，并探讨其作用机制和作用特点, 为玫瑰精油相关制剂能合理应用于心脑血管系统疾病提供理论依据。

　　参考文献：

　　1. 中华人民共和国药典委员会编. 中华人民共和国药典 2010 年版( 一部) [S]. 中国医药科技出版社，2010: 185.

　　2.李明,彭艳丽,韩莉,等.山东玫瑰花的生产情况调查[J].山东中医杂志,2005,10(3):196-199.

　　1. 张秀兰，凌泽坤，刘志林，等.玫瑰舒心口服液治疗气滞血瘀型冠心病心绞痛的研究[J].中西医结合杂志，1992，12(7)：414-415. 2. 杨少友.中医对冠心病的认识与辨证论治[J].中国现代医学杂志,2000,8(2): 68.

　　3. 王世军，陈强，乐向东，等.中药药物香烟提取物对小鼠肠系膜微循环的影响[J].山东生物医学工程，1994，13(2)：32-37.

　　4.王军，乐向东，蒋继强，等.玫瑰花总提取物对小置肠系膜微循环的影响[J].山东生物医学工程，1997，16(4)：20-23.

　　5.李字晶，杨永新，康金国，等.新疆玫瑰花、肉苁蓉对大鼠缺血心肌的保护作用[J].新疆中医药，1998,16(1)：49-51.

　　6. 牛淑敏,朱颂华,李巍,等.中药材玫瑰花抗氧化及作用机制的研究[J].南开大学学报，2004，37(2)：29-33.

　　7. 鲁红,李明,郑淑芬,等.玫瑰花药材中氨基酸及微量元素含量分析[J].中国当代医药,2009,16(16):133-134.

　　8. 李明,彭艳丽,韩莉,等.不同品种玫瑰花挥发油化学成分的GC-MS分析[J].中成药,2008,30(5):104-108.

　　三、培养目的和预期成果

　　1.培养目的

　　观察玫瑰精油对小鼠心肌缺血的影响

　　本实验采用水蒸气蒸馏提取法提取精油，注射异丙肾上腺素制造小鼠急性心肌缺血模型，研究其对心肌缺血的保护作用。

　　通过本实验的研究使得学生能独立设计试验方案，掌握整个试验过程，方法和流程，熟练的运用各种实验仪器，培养学生思考问题和解决问题的能力，最后通过整理和分析原始试验数据，撰写一篇合格的论文。

　　2.预期成果 掌握一套技术，正交试验设计的应用;学习一种模式，即科学研究的一般思维和方法;书写一篇论文，即专题研究报告。

　　四、拟采取的研究方法和技术路线

　　1.药液的制备

　　(1) 玫瑰精油的提取

　　a.称取 100 g 玫瑰花瓣，置于研钵中捣碎，放入 250 mL 的圆底烧瓶中，用 50 毫升蒸馏水分三次刷洗研钵及研棒, 并将洗液一并倒入圆底烧瓶中。

　　b. 按图1所示安装蒸馏装置

　　(A- 水蒸气发生器;B- 安全管;C- 水蒸气导管;D- 三口圆底烧瓶; E- 溜出液导管;F- 冷凝管)

　　c. 通人蒸汽前, 应该先预热放好原料的圆底烧瓶至微沸通入蒸汽、收集馏出液。蒸馏结束的标志是冷凝器中不再有油珠滴出为止，大约需 1.5-2 小时

　　d. 向收集瓶里乳白色的乳浊液中加入质量浓度为 0.1g/ml 的氯化钠溶液，使乳化液分层。分液收集下层的玫瑰精油。向精油中加入少量无水硫酸钠，吸去水分，放置过夜。

　　(2)玫瑰水煎液的制备

　　将提取完精油后的玫瑰药渣于干净药罐，药物按重量比加8倍量水浸泡0.5h，文火煎煮2次，第1次40min，第2次30min，合并两次水煎液，3500r/min离心15min，倒出上清液，70℃恒温水浴，浓缩药液，高压灭菌后4℃冰箱储存备用。

　　2.受试物的制备 小鼠40只，雌雄各半，体重(22-25)g，按体重随机分为4组，10只/组，雌 雄各半。具体分组情况如下：正常组、模型组、玫瑰挥发油组、玫瑰水煎液组。每10克体重的小鼠灌胃量为0. 2ml, 正常对照组自由进食及饮水，模型组给予等容量蒸馏水灌胃;玫瑰挥发油组按36.00g/kg给药;每日1次,连续给药5天。

　　3.检测项目 第5天末次给药后1h，正常组颈背部皮下注射生理盐水，模型组及药物组相同部位注射盐酸异丙肾上腺素，给药量均为20mg/kg，连续注射3d，每天1次。末次注射2h后，断颈取血，分离血清，用试剂盒测定LDH、CK活性。采血后迅速取出完整心脏，在4℃下匀浆，3500r/min离心提取上清液，用试剂盒测定SOD活性及MDA含量。

　　4.数据处理

　　所有数据均表示为ˉx±s,采用SSPS17.0软件，用两个独立样本的t检验对数 据进行统计分析，显著性标准为P<0.05 P<0.01 。 5.结果分析

　　五、课题实施进度方案

　　第一阶段(3月9日-3月16日)：专题生开会，安排工作任务，讲解研究思路和工作注意事项，文献检索，起草实验方案。

　　第二阶段(3月17-25日)：修订实验方案，准备实验物资，预实验。

　　第三阶段(3月28日-4月5日)：正式实验研究开始，适时进行阶段小结。 第四阶段(4月6日-4月12日)：实验总结，书写实验报告及论文。

　　六、经费来源及预算

　　经费支出预算

　　科 目 金额(元)

　　实验动物(小鼠) 190

　　受试物(玫瑰花) 100

　　异丙肾上腺素(Iso) 50

　　其他 100

　　合 计 540

　　七、研究场所及所需设备

　　研究场所 中药化学实验室 药理学实验室

　　主要设备 水蒸气蒸馏提取器

　　分析天平 离心机 HH-601型电热恒温水浴锅 温度计 注射器 小鼠灌胃器 烧杯 容量瓶等玻璃仪器